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苏州滴度测定方法

作者: 来源: 日期:2019-1-23 9:09:16 人气:328

苏州滴度将生长状态良好的 293T 细胞消化计数后稀释至1´105/ml, 加入96孔板,100 ml/孔(1´104个细胞),每种病毒需要6个孔。放入37℃,5% CO2培养箱中培养过夜。

苏州滴度在 EP 管中做10倍梯度稀释,连续6个稀释度。稀释方法如下:每种病毒准备6个1.5 ml EP 管,每管加入90 ml完全培养基,往第一个管中加入10 ml病毒原液,混匀后,吸取10 ml 加入第二个管混匀。以此类推。然后把稀释好的病毒和细胞孵育过夜。吸去带有病毒的培养液,在每个孔中再加入100 ml 完全培养液,以利于细胞的生长。显微镜观察荧光。此时荧光会有初步表达。

苏州滴度MOI 是multiplicity of infection的缩写,中文译为感染复数,实际的含义即为每个细胞被多少个有活力病毒所感染。各种细胞的最适MOI值有差别,请客户正式实验前先进行预实验摸索最适MOI。
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