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苏州滴度值测定方法

作者: 来源: 日期:2019-1-7 10:04:50 人气:231
细胞准备将生长状态良好的 293T 细胞消化计数后稀释至1x105/ml, 加入96孔板,100ul/孔,为每个病毒准备6 个孔。放入37℃,5%CO2 培养箱中培养。

加病毒第二天,在 EP 管中做3 倍梯度稀释,连续6 个稀释度。稀释方法如下:每种病毒准备6 个1。5mlEP 管,每管加入90ul 培养液,往第一个管中加入10ul 病毒原液,混匀后,吸取10ul 加入第二个管混匀。以此类推,做十个稀释度(10~3*10-3)。

苏州滴度值追加培养液第三天,吸去带有病毒的培养液,在每个孔中再加入100ul 完全培养液,以利于细胞的生长。

苏州滴度值观察结果并计算滴度 第五天,在荧光显微镜下观察结果。滴度(PFU/ml)=细胞数*荧光百分比*MOI*病毒稀释倍数*103.
 
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