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苏州慢病毒存活测定方法

作者: 来源: 日期:2018-12-25 14:52:51 人气:223
苏州慢病毒存活细胞准备 将生长状态良好的 293T 细胞消化计数后稀释至1x105/ml, 加入96孔板,100ul/孔,为每个病毒准备6 个孔。放入37℃,5%CO2 培养箱中培养。

第二天,在 EP 管中做3 倍梯度稀释,连续6 个稀释度。苏州慢病毒存活稀释方法如下:每种病毒准备6 个1。5mlEP 管,每管加入90ul 培养液,往第一个管中加入10ul 病毒原液,混匀后,吸取10ul 加入第二个管混匀。以此类推,做十个稀释度(10~3*10-3)。

追加培养液 第三天,吸去带有病毒的培养液,在每个孔中再加入100ul 完全培养液,以利于细胞的生长。

苏州慢病毒存活观察结果并计算滴度 第五天,在荧光显微镜下观察结果。滴度(PFU/ml)=细胞数*荧光百分比*MOI*病毒稀释倍数*103.

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